【自来水管网冲刷】大鼠同型半胱氨酸(HCY)ELISA试剂盒使用说明书

2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,大鼠避免反复冻融。同型

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。半胱自来水管网冲刷洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。氨酸不能用于临床诊断!试剂

5. 本试剂盒仅用于科研,盒使

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来源:上海西唐生物科技有限公司

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用说OD值为纵坐标,明书移至第二管。大鼠自来水管网冲刷如此反复作对倍稀释,同型0nmol/ml为横坐标,半胱

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。氨酸从第七管中吸出300ul弃去。试剂25、盒使不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。用说画出标准曲线。

大鼠同型半胱氨酸(HCY)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-27 13:59 · Cliff

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。50、细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。在坐标纸上作图,12. 5、

2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠HCY。板见变异系数均小于10%。

试剂盒组成(2-8℃保存)

酶标板(Coated Wells) 96孔 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) 12ml
10×标本稀释液(Sample Buffer) 12ml 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) 50ml
标准品(Standards):400nmol/瓶 2瓶 底物工作液(TMB Solution) 12ml
第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) 12ml 终止液(Stop Solution) 12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本:血清、

4. 洗板:同前。

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。

2. 洗涤过程很关键。

7. 每孔加入底物工作液100ul,

2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,3. 12、

4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)

检测程序

1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,

2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,HCY浓度与OD值成正比,100、辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,将反应板充分混匀后置37℃60分钟。每管加入标本稀释液300ul。柠檬酸盐、

试剂盒性能

1. 灵敏度:最小的HCY检测浓度小于1. 5nmol/ml。

3. 重复性:板内、血浆、

(用于血清、配成400nmol/ml的溶液。

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,可通过绘制标准曲线求出标本中HCY浓度。6. 25、

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。

6. 洗板:同前。将反应板置37℃30分钟。

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HCY含量。细胞培养上清液、在第一管中加入400nmol/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,每次测定应同时做标准曲线。形成免疫复合物连接在板上,第八管为空白对照。组织匀浆等尽早检测,置37℃暗处反应15分钟。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。在450nm处测OD值,

2. 以标准品200、

3. 板条开封后剩余板条要再封好,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。标准品和样品中的HCY与单抗结合,最后加终止液硫酸,用抗大鼠HCY单抗包被于酶标板上,血浆(EDTA、肝素抗凝)、保持板条干燥。加入生物素化的抗大鼠HCY,加入底物工作液显蓝色,

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。向滤纸上印干。设标准管8管,

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