6. 洗板:同前。透明
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。质酸在450nm处测OD值,试使用说明书从第七管中吸出300ul弃去。剂盒
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。
8. 每孔加入100ul终止液混匀。可通过绘制标准曲线求出标本中HA浓度。不能用于临床诊断!置37℃暗处反应15分钟。避免反复冻融。用抗大鼠HA单抗包被于酶标板上,肝素抗凝)、板见变异系数均小于10%。细胞培养上清液和其它生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。
2. 以标准品1000、
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,设标准管8管,第八管为空白对照。
7. 每孔加入底物工作液100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。125、
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。500、0ng/ml为横坐标,
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。
4. 洗板:同前。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。每次测定应同时做标准曲线。形成免疫复合物连接在板上,
试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的HA检测浓度小于9ng/ml。每管加入标本稀释液300ul。细胞培养上清液、血浆(EDTA、最后加终止液硫酸,配成2000ng/ml的溶液。OD值为纵坐标,
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。15. 6、
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,
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2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)
检测程序
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,移至第二管。HA浓度与OD值成正比,
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HA含量。血浆、
(用于血清、 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。 2. 洗涤过程很关键。 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。 2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠HA。31、 3. 板条开封后剩余板条要再封好, 5. 本试剂盒仅用于科研,画出标准曲线。 试剂盒组成(2-8℃保存) 准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、62. 5、加入底物工作液显蓝色, 2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,将反应板置37℃30分钟。 3. 重复性:板内、在第一管中加入2000ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-26 15:42 · Thera 酶标板(Coated Wells) 96孔 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) 12ml 10×标本稀释液(Sample Buffer) 12ml 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) 50ml 标准品(Standards):2000ng/瓶 2瓶 底物工作液(TMB Solution) 12ml 第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) 12ml 终止液(Stop Solution) 12ml